Основите на дихидромирицетина

Дихидромирицетинът е мощен инхибитор на дихидропиримидазата с IC50 от 48 μM. Дихидромирицетинът активира автофагията чрез инхибиране на mTOR сигнализирането. Дихидромирицетинът инхибира образуването на mTOR комплекс (mTORC1/2).

Цел: дихидропиримидиназа: 48 μM (IC50); mTORC1; mTORC2; автофагия

In vitro проучвания: дихидромирицетинът, флавонол, значително инхибира каталитичната активност на дихидропиримидазата спрямоестествен субстрат дихидроурацил и ксенобиотичен субстрат 5-пропил-хидантоин. Дихидромирицетинът показва значителен инхибиторен ефект върху активността на дихидропиримидазата върху двата субстрата, дори повече от мирицетина. Стойностите IC50 на дихидромирицетин за дихидропиримидаза, определени с помощта на криви на титруване на дихидроурацил и 5-пропилхидантоин, бяха съответно 48±2 и 40±2 μM[1]. Добавянето на дихидромирицетин (DHM) значително обърна увеличението на фосфорилирането на mTOR при Ser2448 (p-mTOR) по време на прилагане на D-gal, което предполага, че дихидромирицетинът може да активира аутофагията чрез инхибиране на сигнализирането на mTOR.

Проучване in vivo: Нормалната контролна група, D-gal група, D-gal плюс дихидромирицетин (100 mg/kg) група, D-gal плюс дихидромирицетин (200 mg/kg) група бяха оценени чрез воден лабиринт на Morris (MWM) Промени в способността за учене и памет при плъхове) (n=10 на група). Лечението с дихидромирицетин (DHM) значително скъсява латентността на бягство в сравнение с моделната група, индуцирана от D-gal.

Разтворимост: In vitro: DMSO: По-голямо или равно на 100 mg/mL (312,26 mM), "По-голямо или равно на" означава разтворим, но насищането е неизвестно. In vivo: 1. Добавете всеки разтворител един по един: 10 процент DMSO 90 процента (20 процента SBE- -CD във физиологичен разтвор) Разтворимост: По-голяма или равна на 2,5 mg/mL (7,81 mM); бистър разтвор 2. Добавете всеки разтворител един по един: 10 процента DMSO 40 процента PEG300 5 процента Tween-80 45 процента физиологичен разтвор Разтворимост: по-голяма или равна на 2,5 mg/mL (7,81 mM); Бистър разтвор 3. Добавете всеки разтворител един по един: 10 процента DMSO 90 процента царевично масло Разтворимост: По-голяма или равна на 2,5 mg/mL (7,81 mM); бистър разтвор.

Готово решение:

1 mM 3,1226 mL 15,6128 mL 31,2256 mL

5 mM 0.6245 mL 3,1226 mL 6,2451 mL

10 mM 0,3123 mL 1,5613 mL 3,1226 mL

Тест за киназа: Използват се бързи спектрофотометрични анализи за определяне на ензимните активности на хидантоиназа, алантоиназа, дихидротирозиназа и иминаза. Като субстрати са използвани дихидроурацил, {{0}}пропил-хидантоин и фталимид. Освен ако изрично не е посочено друго, дихидроурацил (2 тМ) се използва като субстрат в стандартния анализ за дихидропиримидаза. Накратко, намаляването на абсорбцията при 230, 248 и 298 nm беше измерено при хидролиза на дихидроурацил, 5-пропил-хидантоин и фталимид като субстрати при 25 градуса, съответно. За да започне реакцията, пречистена дихидропиримидаза (10-70 ug) се добавя към 2 mL от разтвор, съдържащ субстрат и 100 mM Tris-HCl (pH 8.0 ). Хидролизата на субстрата се наблюдава с UV/vis спектрофотометър. Коефициентът на екстинкция на всеки субстрат беше експериментално определен чрез директно измерване със спектрофотометър. Коефициентите на екстинкция на дихидроурацил, 5-пропил-хидантоин и фталимид са 0,683 mM-1 cm-1 при 230 nm, 0,0538 mM-1 cm-1 при 248 nm и 0,0538 mM-1 cm-1 при 298 nm, съответно при 3,12 mM-1cm-1. Първоначалната скорост на промяна е функция на концентрацията на ензима в диапазона на абсорбция от 0.01-0.18 min-1. Единицата активност се определя като количеството ензим, което катализира хидролизата на 1 μmol субстрат на минута, а специфичната активност се изразява в единици активност на mg ензим. Кинетичните параметри Km и Vmax бяха определени от нелинейни диаграми чрез монтиране на скоростите на хидролиза от отделните експерименти към уравнението на Михаелис-Ментен.

Клетъчни експерименти: Проби от хипокампална и кортикална тъкан се лизират в лизисен буфер, съдържащ 20 mM Tris (pH 7,5), 135 mM NaCl, 2 mM EDTA, 2 mM DTT, 25 mM -глицерофосфат, 2 mM натриев пирофосфат, 10 процента глицерол, 1 процент Triton X Хомогенизирайте. -100, 1 mM натриев ортованадат, 10 mM NaF, 10 ug/mL апротинин, 10 ug/mL леупептин и 1 mM PMSF върху лед за 30 минути и се центрофугира при 12000 xg, 4 градуса за 30 минути. Супернатантата беше събрана и количественото определяне на протеина беше извършено с помощта на BCA комплект. Протеиновите проби се варят в продължение на 5 минути при 95 градуса в присъствието на буфер за проби. Целевите протеини бяха разделени чрез електрофореза с натриев додецилсулфат полиакриламиден гел (SDS-PAGE), прехвърлени към нитроцелулозни мембрани и изследвани със съответните първични и вторични антитела. Накрая, визуализирайте целевия протеин чрез излагане на рентгенов филм с реагенти за подобрена хемилуминесценция (ECL).

Експерименти с животни: Плъхове Бяха използвани 40 мъжки Sprague-Dawley (SD) плъха (възраст: 8 седмици; телесно тегло: 160±20 g). Плъховете бяха разделени на случаен принцип в 4 групи, включително нормална контролна група, D-gal моделна група и D-gal, комбинирани с DHM, с дози съответно 100 и 200 mg/kg-d, с 10 плъха във всяка група. Всички плъхове бяха настанени в среда със стайна температура от 22 ± 2 градуса и тъмен фотопериод (12 часа:12 часа) с достъп до храна и вода ad libitum. След 1 седмица на аклиматизация към новата среда, на плъховете от групата с DHM се прилагат чрез сонда посочените дози DHM, разтворени в дестилирана вода, веднъж дневно в 8:00 сутринта в продължение на 6 последователни седмици. Плъховете от нормалната контролна група са били дозирани с дестилирана вода. С изключение на нормалната контролна група, плъхове в други групи бяха инжектирани подкожно с D-gal в доза от 150 mg/kg.d в продължение на 6 последователни седмици. Всяко приложение на DHM трябва да бъде 2 часа преди инжектирането на D-gal.

Доставка: стайна температура; може да варира

98 процента

1. Бърза доставка. Осигуряване на качество

2. Нашият екип за научноизследователска и развойна дейност е съставен от постдокторанти, завършили биологични и хранителни науки с независими възможности за научноизследователска и развойна дейност.

3. Предоставяне на персонализирана услуга за опаковане. OEM услуга, включително: софтгел, капсула, таблетка, саше, гранула и др. Услуга за производство на специфични за клиента продукти с повече от 100 клиенти по целия свят.

4. Над 10 години опит в производството на билкови продукти по GMP стандарт. Пълен опит в контрола на качеството и приложението на билкови екстракти.